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金太阳黔东南州2023-2024学年度第二学期期末教学质量检测高二(24-599B)生物答案

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25.(16分)隐花色素(CY2.蛋白)是拟南芥中一种蓝光受体蛋白,激活后将信号传递到下游,调控植物的光形态建成。为探究蓝光下CRY2蛋白与下游蛋白SPA1间的作用机制,某研究团队将基因SPA1与基因AD(AD为转录因子1)融合构建了AD重组载体,将基因CRY2与基因BD(BD为转录因子2)融合构建了BD重组载体,将两重组质粒导入带有报告基因His的酵母菌,(缺少Tp、,Lu合成基因)。酵母菌内报告基因His的表达产物为组氨酸,转录时需要AD和BD共同作用于转录因子结合序列,两蛋白分开时不能激活Hs基因的转录。Sau3AS2宁b链注:启动子:◆终止子:一AD-载体大别S1、S2为扩增引物重组质拉》瑞微梁T印:色氨酸合成基因Leu:亮氨酸合成基因Hia:组氢酸合成基因▣酵母脑录因子结合序列SPA1和CRY2的b链为转录模板链DSau3A ISalIBamH I 5'-G4GATCG-3EcoR I重组质粒EcoR I 5-GLAATTC-3Sau3A I 5'-4GATC-3Sal I EcoRI BamHIEcoRI原BD-粮体SalI5-GITCGAC-3HOCRY2Pa链Hb硅导)(1)研究SPA1蛋白与CRY2蛋白的相互作用时,先提取拟南芥细胞中总RNA,再通过PCR分别扩增出基因SPA1和基因CRY2,PCR过程需要的酶是,加入dNTP可为PCR过程提供(2)为正确构建AD SPA1融合基因,扩增基因SPA1时,与a链结合的引物为需要在其(填3’”或“5’”)端添加的限制酶识别序列是。构建BD-CRY2基因表达载体时,切割基因CRY2时,应选择的限制酶是理由是0(3)将两种重组质粒导入前,需先用无菌的C溶液处理酵母菌,目的是。为保证两目的基因表达的蛋白具有正常的结构和功能,选择酵母菌而不是细菌作为受体细胞,原因是(4)将导入不同载体组合的酵母菌,在不同类型的培养基上对比培养,蓝光照射下培养结果如图。其中,培养基①是缺乏Tp(色氨酸)和Lu(亮氨酸)的基本培养基,导入不同载体组合的酵母菌在该培养基上都能生长,原因是。培养基②应为缺乏的培养基,菌落e能在该培养基上生长的原因是BDBDBDBD载体重组载体载体重组载体ADAD体载体ADAD重组载体重组较体①②高二生物学第8页(共8页)
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